藥用輔料一般是指在生物制劑配方中包含的非活性成分，雖然是非活性成分，但藥用輔料往往具備賦形，成型，增溶，助溶等作用，甚至會(huì )影響藥效，藥品質(zhì)量和安全性等方面。所以，藥用輔料在整個(gè)制藥過(guò)程一直受到各制藥企業(yè)的重視。藥用輔料同時(shí)需要達到較高的標準才可在生產(chǎn)中使用，如高純度，低內毒素，符合多國藥典標準，以及ICH（International Conference on Harmonization of Technical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use）特定標準等。

糖類(lèi)輔料是藥用輔料中被廣泛使用的一類(lèi)輔料，如海藻糖，蔗糖，半乳糖，甘露醇，甘露糖，麥芽糖，山梨醇等。蔗糖由于獨特的性質(zhì)，一直被用于蛋白的穩定劑及細胞培養過(guò)程當中。近年來(lái)，研究人員對海藻糖的研究逐漸增多，由于海藻糖的大規模生產(chǎn)和純化技術(shù)的發(fā)展以及海藻糖在熱穩定性等方面都優(yōu)于蔗糖，海藻糖成為各制藥企業(yè)最常用到的用于穩定蛋白的糖類(lèi)輔料。對于糖類(lèi)輔料在最終制劑配方中的使用大家已經(jīng)熟知，而近幾年對糖類(lèi)輔料研究的不斷深入，發(fā)現這些常規的輔料在制藥的其他階段，如細胞培養，純化等階段，都有不同的應用。本篇文章主要就是匯總一些近些年關(guān)于糖類(lèi)輔料在生物制藥過(guò)程中的新應用，希望可以給制藥公司研發(fā)人員提供一些新思路。

1.海藻糖在細胞保存中的應用

細胞的低溫保存是生物制藥過(guò)程中重要的一個(gè)環(huán)節，細胞保存的好壞影響著(zhù)復蘇后細胞的活性和狀態(tài)，最終將影響蛋白的產(chǎn)量。DMSO（二甲基亞砜）是科研及工業(yè)中常用的細胞凍存時(shí)使用的防凍劑，可以有效的防止冷凍過(guò)程中細胞內形成冰晶。但DMSO問(wèn)題就是其具備較高的毒性，這不僅會(huì )對細胞造成一定影響，嚴重威脅著(zhù)使用者的身體健康。好消息是，研究表明由于海藻糖的特殊性質(zhì)，海藻糖也可用于細胞凍存，而且效果不比使用DMSO差。一些大型先進(jìn)的制藥企業(yè)，已經(jīng)在內部嘗試使用海藻糖代替DMSO進(jìn)行細胞凍存。實(shí)驗數據證明，逐漸降低DMSO用量，增加海藻糖用量對細胞進(jìn)行凍存處理，在復蘇后，細胞狀態(tài)和活性與完全使用DMSO進(jìn)行凍存無(wú)任何差異。這些企業(yè)現在也正在積極嘗試摸索完全使用海藻糖代替DMSO進(jìn)行凍存的條件，相信這項技術(shù)會(huì )使使用者不再被DMSO這種毒性試劑所困擾。

2.海藻糖在細胞培養中的應用

在治療性抗體的生產(chǎn)過(guò)程中，經(jīng)常困擾著(zhù)眾多企業(yè)的就是這些抗體的聚集現象。抗體蛋白的聚集可導致蛋白大小，可逆性，溶解度，結合能力，構象的改變，這些結構上的變化直接導致蛋白滴度及免疫性的降低。而且，這些結構變化還會(huì )導致新的抗原表位出現，導致了不在預期之內的免疫反應的發(fā)生。最近一項研究表明，實(shí)驗人員在CHO細胞培養過(guò)程中分別使用含海藻糖和不含海藻糖培養基去培養細胞，隨著(zhù)培養時(shí)間的推移，在某一時(shí)間點(diǎn)，無(wú)海藻糖培養基中的活細胞密度急劇下降至接近0，而含海藻糖培養基中的活細胞密度始終保持穩定。另一方面，含海藻糖培養基表達蛋白的濃度也是一直高于不含海藻糖培養基中的表達。同時(shí)，對這兩個(gè)不同培養基中表達蛋白mRNA進(jìn)行Real-time PCR的結果也是如此。這種現象是因為海藻糖在細胞生長(cháng)過(guò)程中充當一種具抗聚集作用的化學(xué)分子伴侶，同時(shí)海藻糖在這個(gè)過(guò)程中還可以穩定細胞膜和蛋白，使細胞活性提高，進(jìn)而增加目的蛋白產(chǎn)量。因此，該研究為提高治療性抗體產(chǎn)品質(zhì)量提供了一個(gè)切實(shí)可行的方案。

3.海藻糖在純化過(guò)程中的應用

海藻糖這種抗聚集的作用不僅可以應用于細胞培養階段，同時(shí)還可應用于純化階段。純化柱的制備是影響蛋白純化的核心，好的純化柱對可以保證最大程度去除雜質(zhì)，這樣可以保證最終藥物蛋白的藥效和安全性。然而，純化柱不是可以一直使用的，由于損耗，需要隨時(shí)更換新的純化柱。而海藻糖使得蛋白聚集現象大幅降低，這樣無(wú)形中延長(cháng)了純化柱的使用壽命，使時(shí)間和成本大幅降低。大致估算海藻糖的應用可以使純化柱壽命延長(cháng)三分之一左右。

4.半乳糖在細胞培養中的應用

葡萄糖和谷氨酰胺一直作為細胞培養基中的主要碳源和能量來(lái)源，但由于培養基中葡萄糖和谷氨酰胺代謝速度過(guò)快，并且這個(gè)過(guò)程中大量積累乳酸和銨，抑制細胞功能，使得培養效率變得非常低。為了克服這一阻礙，研究人員嘗試使用半乳糖和谷氨酸鹽替換以上兩種成分。結果表明更換為半乳糖和谷氨酸鹽后，乳酸和銨的積累明顯降低，并且極大延長(cháng)了培養基培養時(shí)間，這種方法為細胞培養提供了一個(gè)更有效的方案。在實(shí)際應用中，許多企業(yè)已經(jīng)在使用半乳糖來(lái)替換葡萄糖了。

Pfanstiehl Inc.于1919年在美國伊利諾伊州成立，一百多年的研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗使其成為專(zhuān)業(yè)化生產(chǎn)高品質(zhì)藥用糖類(lèi)輔料的企業(yè)。Pfanstiehl代表產(chǎn)品有海藻糖，蔗糖，半乳糖等，產(chǎn)品具備高純度，低內毒素，注射級藥用輔料，符合包括中國藥典在內的多國藥典標準以及ICH Q3D金屬元素標準。同時(shí)，為了配合CFDA關(guān)于藥包材藥用輔料與藥品關(guān)聯(lián)審評政策，Pfanstiehl積極配合制藥企業(yè)進(jìn)行關(guān)聯(lián)審評，現階段Pfanstiehl海藻糖和蔗糖均提交了關(guān)聯(lián)審評材料，并且獲得海藻糖關(guān)聯(lián)審評受理號。

北京西美杰科技有限公司作為Pfanstiehl中國代理商已經(jīng)成為中國地區眾多生物制藥與疫苗企業(yè)的供應商，同時(shí)，西美杰會(huì )繼續為中國客戶(hù)提供更多的產(chǎn)品與服務(wù)，讓企業(yè)在原輔料篩選，產(chǎn)品生產(chǎn)與質(zhì)檢，申報等工作中節省人力，資金，時(shí)間。